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Nel diciannovesimo secolo fu deciso che 250mm era un adeguata distanza di visualizzazione, per la maggior parte delle persone, per permettere all’occhio umano di distinguere i dettagli di un oggetto e che l’ingrandimento poteva essere calcolato se si assumeva che l’immagine vista nell’oculare di un microscopio fosse localizzata nello spazio a un piano distante 250mm dall’ occhio dell’operatore. A quella distanza (o ogni distanza minore di infinito) tutte le caratteristiche dell’immagine dovrebbero avere dimensioni calcolabili e, quindi, dovrebbero essere compatibili ad altre immagini misurate nello stesso piano.
L’ingrandimento attuale è determinato utilizzando un oggetto di dimensioni note e poi misurando la dimensione della sua immagine proiettata a una distanza di 250mm dalla pupilla di uscita dello strumento, nel caso del microscopio 250mm dal disco Ramsden dell’oculare. Al contrario la dimensione di ogni particolare dell’oggetto può essere determinata misurando la dimensione del particolare diviso l’ingrandimento. Questo standard è ancora in uso oggi, tanto che il potere di ingrandimento di lenti semplici è determinato dividendo la loro lunghezza focale per 250mm. Per esempio, una lente d’ingrandimento manuale con una lunghezza focale di 25mm ha un ingrandimento di 10x. Per molti anni nel 1800, i produttori di microscopi nel Regno Unito, in osservanza a questo standard, avevano fissato per i loro strumenti una lunghezza del tubo (tra obiettivo ed oculare) di 250mm. ma questi si dimostrarono poco pratici nell’uso. Fino allo sviluppo, abbastanza recente, di obiettivi corretti all’infinito e per la maggior parte del ventesimo secolo lo standard accettato per gli obiettivi di un microscopio era un “optical tube length” di 160mm. In altre parole, un obiettivo produce un’immagine ad un certo ingrandimento solo quando proietta la sua immagine a una distanza di 160mm misurata dal suo “back focal plane”. Questa fu anche la distanza richiesta per la correzione sferica dell’immagine ingrandita

Secondo questi criteri un obiettivo che ha una lunghezza focale di 16mm è un obiettivo 10x. Un obiettivo con ingrandimento 40x ha una lunghezza focale di 4mm.

Magniications of objective lenses is given by following calculation:

Example :

M = 165 / 4.3 = 38,37 (magnification of objective in a ZEISS infinity system microscope).